如何利用荧光显微镜检测细胞凋亡

如何利用荧光显微镜检测细胞凋亡

1、收集约106细胞，用冷PBS洗2次。

2、4%福尔马林4℃固定10min左右后涂片，晾干。

3、以5-10μg/mL hocchst 33258染色5-10min，水冲净，晾干后观察，以紫外光（340nm）激发hocchest。

4、细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。

5、细胞凋亡有别于细胞坏死，它有一系列的细胞形态学和生物化学的改变，包括出现染色体浓缩、DNA降解、凋亡小体的形成等。在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine,PS）位于细胞膜内侧，但在凋亡细胞中，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中，Annexin-V（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+的依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。因此将Annexin-V进行荧光素（如FITC 、PE）或生物素（biotin）标记，以标记了的膜联蛋白-V作为探针，利用荧光显微镜检测细胞凋亡的发生。

如何利用琼脂糖凝胶电泳回收核酸

琼脂糖凝胶电泳回收核酸的常用方法：

常规琼脂糖电泳后，在目的条带前方挖槽，灌入低熔点琼脂糖，凝胶后再电泳一小会儿，等条带进入低熔点琼脂糖区域再将琼脂糖切出来，就可以非常节约了。

除了直接酚抽低熔点琼脂糖凝胶，还有人用琼脂糖酶来消化琼脂糖凝胶，条件也相当温和，但琼脂糖酶价格并不便宜（酶的成本至少5-6块），多数的酶只适合用低熔点琼脂糖，费时间还特长，所以并不是得特别好用。

T家的琼脂糖酶可以用于常规琼脂糖，前提是你有办法在65度把那胶化了，但那需要极好的耐心。

如何利用你的身边的资源

找找你身边的资源，你会有很大的收获。

找到自己身边的资源，包括人和物，还有其他因素。

把自己身边的资源运用好，充分发挥好。

如果你是学生，你身边的同学，老师，还有书本就是你最宝贵的资源。

手机，也可以是你不断成长的来源，在这个网络时代,只要你想的，你努力就可能实现。

别忽略你身边的人和事，也许那就是你要的东西，只是你忽略了。

资源可以是任何东西，可大可小，重点在于你是否能找到，是否能利用。